Amidase (AMD)
Ensymau:Yn gatalyddion biolegol macromoleciwlaidd, mae'r rhan fwyaf o ensymau yn broteinau.
Amidase:Catalyddu hydrolysis amrywiol amidau aliffatig ac aromatig mewndarddol a thramor trwy drosglwyddo grŵp asyl i ddŵr gan gynhyrchu asidau rhydd ac amonia. Defnyddir asidau hydroxamig ac asidau organig eraill yn helaeth fel cyffuriau oherwydd eu bod yn gyfansoddion o ffactorau twf, gwrthfiotigau ac atalyddion tiwmor. Gellir rhannu'r amidases yn asylasau math R a math S yn ôl stereodetholusrwydd y catalydd.
Yn ogystal â chataleiddio hydrolysis amidau, gall amidase hefyd gataleiddio adweithiau trosglwyddo asyl ym mhresenoldeb cyd-swbstradau fel hydroxylamin.
Mae gan amidase o wahanol ffynonellau wahanol benodolrwydd swbstrad, dim ond amidau aromatig y gall rhai ohonynt hydrolysu, dim ond amidau aliffatig y gall rhai ohonynt hydrolysu, ac mae rhai yn hydrolysu amidau α-neu ω-amino. Dim ond ar gyfer amidau aromatig asyclig neu syml y mae gan y rhan fwyaf o'r aminau weithgaredd catalytig da, ond ar gyfer aromatigau cymhleth, mae amidau heterocyclig, yn enwedig amidau ag amnewidion ortho, yn gyffredinol yn isel o ran gweithgaredd (dim ond ychydig o ensymau sy'n arddangos effeithiau catalytig gwell).
Mecanwaith catalytig:
| Ensymau | Cod Cynnyrch | Cod Cynnyrch |
| Powdwr Ensym | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | set o 19 amidase, 50 mg yr un 19 eitem * 50mg / eitem, neu faint arall |
| Pecyn Sgrinio (SynKit) | ES-AMD-1900 | set o 19 amidase, 1 mg yr un 19 eitem * 1mg / eitem |
★ Penodoldeb swbstrad uchel.
★ Detholusrwydd cirol cryf.
★ Effeithlonrwydd trosi uchel.
★ Llai o sgil-gynhyrchion.
★ Amodau adwaith ysgafn.
★ Cyfeillgar i'r amgylchedd.
➢ Dylid sgrinio ensymau ar gyfer swbstradau penodol oherwydd manylder y swbstrad, a chael ensym sy'n cataleiddio'r swbstrad targed gyda'r effaith catalytig orau.
➢ Peidiwch byth â dod i gysylltiad ag amodau eithafol fel: tymheredd uchel, pH uchel/isel a thoddyddion organig â chrynodiad uchel.
➢ Fel arfer, dylai'r system adwaith gynnwys swbstrad, hydoddiant byffer (pH adwaith gorau posibl yr ensym). Dylai cyd-swbstradau fel hydrocsylamin fod yn bresennol yn y system adwaith trosglwyddo asyl.
➢ Dylid ychwanegu AMD olaf i'r system adwaith gyda pH a thymheredd adwaith gorau posibl.
➢ Mae gan bob math o AMD amodau adwaith gorau posibl amrywiol, felly dylid astudio pob un ohonynt ymhellach ar wahân.
Enghraifft 1(1):
Gweithgaredd hydrolysis i wahanol Swbstradau Amid
| Swbstrad | Gweithgaredd penodol μmolau min-1mg-1 | Swbstrad | Gweithgaredd penodol μmolau min-1mg-1 |
| Asetamid | 3.8 | ο-OH bensamid | 1.4 |
| Propionamid | 3.9 | p-OH bensamid | 1.2 |
| Lactamid | 12.8 | ο-NH2bensamid | 1.0 |
| Butyramid | 11.9 | p-NH2bensamid | 0.8 |
| Isobutyramid | 26.2 | ο-Toluamid | 0.3 |
| Pentanamid | 22.0 | p-Toluamid | 8.1 |
| Hexanamid | 6.4 | Nicotinamid | 1.7 |
| Cyclohexanamid | 19.5 | Isonicotinamid | 1.8 |
| Acrylamid | 10.2 | Picolinamid | 2.1 |
| Metacrylamid | 3.5 | 3-Ffenylpropionamid | 7.6 |
| Prolinamid | 3.4 | Indol-3-asetamid | 1.9 |
| Bensamid | 6.8 |
Cynhaliwyd yr adwaith mewn toddiant byffer sodiwm ffosffad 50mM, pH 7.5, ar 70 ℃.
| Amidau | Hydroxylamin | Hydrazin |
| Asetamid | 8.4 | 1.4 |
| Propionamid | 18.4 | 3.0 |
| Isobutyramid | 25.0 | 22.7 |
| Bensamid | 9.2 | 6.1 |
Cynhaliwyd yr adwaith mewn toddiant byffer sodiwm ffosffad 50mM, pH 7.5, ar 70 ℃.
Crynodiad adweithydd cysylltiedig: amidau, 100 mM (bensamid, 10 mM); hydroxylamin a hydrasin, 400 mM; ensym 0.9 μM.
Enghraifft 2(2):
Enghraifft 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al. Eithafolau, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, ac eraill. Biocemeg Prosesau, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM, ac eraill. Cemeg Bioorganig, 2017, Ar gael ar-lein 7.
